甲状腺自身免疫疾病中，多种免疫检查点基因突变共同起作用

人体免疫系统设有多种‘检查点’机制，防止能攻击自身组织的淋巴细胞被激活。但某些淋巴细胞为何能突破这些限制、引发自身免疫病，长期以来并不清楚。学界曾推测：免疫调控基因发生体细胞突变，可能让自身反应性淋巴细胞绕过耐受机制——但受限于技术，一直难以验证。本研究采用高精度单分子DNA测序技术（NanoSeq），对自身免疫性甲状腺病（AITD）患者样本开展全外显子组与靶向深度测序。结果发现：大量B细胞克隆独立地、反复地获得了关键免疫检查点基因TNFRSF14（即HVEM）和CD274（即PD-L1）的功能缺失突变；此外还观察到其他免疫相关基因的较少见突变。在炎症严重的甲状腺组织活检中，单一样本就检测到数十至数百个携带不同检查点突变的独立B细胞克隆。研究人员结合激光显微切割、DNA甲基化测序、空间转录组、免疫组化、单核DNA测序及抗体功能验证等多种技术，确认这些突变定位于B细胞，部分克隆确实能识别自身抗原，并存在单个克隆携带多个驱动突变（最多达4–6个）的现象。尤为值得注意的是，TNFRSF14基因常出现双等位基因失活（即完全‘关闭’）。尽管每个突变克隆只占全部B细胞的极小比例（通常<1%），但所有突变克隆加起来，在每位患者中仍构成了相当可观的、携带驱动突变的B细胞群体。这项工作首次在人体组织中系统证实：自身免疫性淋巴细胞可通过多克隆、渐进式的体细胞演化过程，累积免疫检查点突变，从而集体性地突破免疫耐受——这为理解自身免疫病的分子起源提供了全新视角。