免疫“隐身”DNA与重组酶：实现千碱基级基因编辑

传统基因编辑中，利用重组酶将千碱基级大片段DNA插入哺乳动物基因组时，通常依赖大段双链DNA（dsDNA）供体。但双链DNA会强烈激活人体先天免疫系统，产生毒性反应，不仅显著降低基因插入效率，还限制其仅能用于体外操作或免疫缺陷环境中。本研究受原核整合型病毒和可移动遗传元件机制启发，发现重组酶其实能高效识别并作用于一种特殊设计的环状单链DNA（cssDNA）——该分子含有一段部分双链区域，可精准重建重组酶识别序列。研究人员将这一全新策略命名为“通过核内合成模板加长实现整合”（INSTALL）。该技术兼容多种蛋白引导或RNA引导的重组酶，可在人类细胞中高保真地完成千碱基级的基因组‘书写’。实验表明，INSTALL在原代人细胞和小鼠体内均显著减弱先天免疫应答，大幅提升重组酶介导的基因插入效率；更重要的是，它支持全身性、非病毒方式的DNA递送——相比脂质纳米颗粒（LNP）递送的双链DNA，INSTALL的耐受性更强、安全剂量范围更宽。综上，INSTALL通过将‘免疫隐身’核酸与重组酶协同运用，一举突破了DNA递送与整合领域的两大根本瓶颈：免疫毒性与递送效率，为安全、高效、规模化的人类基因组编辑开辟了新路径。