在人体实体肿瘤内开展的全基因组T细胞基因编辑筛选实验

实体瘤治疗中，T细胞疗法常因T细胞难以有效浸润肿瘤、进入后迅速失活而效果不佳。为找出改善这一问题的基因靶点，研究人员开发了一种新型小鼠体内模型：将表达抗CD3单链抗体（scFv）的人源肿瘤细胞植入免疫缺陷小鼠体内，再输入经CRISPR基因编辑的人T细胞。该模型能高效回收肿瘤内部的T细胞（以往回收率极低），且这些肿瘤浸润T细胞表现出典型的功能障碍特征（如PD-1、CD39高表达，IFNγ分泌减少，代谢活性下降），从而为筛选“增强T细胞抗肿瘤能力”的基因提供了真实可靠的生理环境。研究团队由此开展了两项全基因组CRISPR敲除筛选：一项聚焦于“提高T细胞在瘤内数量”，另一项聚焦于“提升T细胞效应功能”（以分泌IFNγ为指标）。第一项筛选发现，P2RY8–Gα13这一G蛋白偶联受体（GPCR）信号轴会阻碍T细胞向肿瘤迁移；第二项筛选则锁定GNAS基因——它编码的Gαs蛋白，是多种抑制性GPCR信号的共同下游汇聚节点，相当于一个“总开关”。敲除GNAS后，T细胞不再被前列腺素E2（PGE2）、腺苷等常见肿瘤微环境抑制因子所压制，对多种实体瘤（黑色素瘤、卵巢癌、胃癌、肺癌等）的杀伤力和持久性均明显增强。更进一步，同时敲除P2RY8和GNAS，既能促进T细胞更多进入肿瘤，又能保障其在瘤内保持强大战斗力，实现了“双管齐下”的协同增效。该研究不仅找到了两个极具临床潜力的新靶点，更建立了一个灵活、可扩展的体内筛选平台，为系统性优化实体瘤T细胞疗法提供了新路径。